Практические основы

Время, час.

1. Принципы организации ПЦР-лаборатории

9 часов

1.1. Техника безопасности и охрана труда. Оборудование. Основные правила обращения.

1

1.2. Подготовка рабочего места. Подготовка посуды, инструментария, пластика, реагентов для работы

3,5

1.3. Уборка помещения, чистка, мытье и подготовка оборудования и инструментария к стерилизации

3,5

1.4. Составление дизайна и программирование эксперимента

0,5

1.5. Правила ведения журнала эксперимента. Заполнение.

0,5

2. Пробоподготовка клеточной массы

4 часа

2.1. Снятие культур клеток эукариот

2

2.2. Криоконсервация клеток

2

3. Принципы выделения нуклеиновых кислот из клеток эукариот

12 часов

3.1. Выделение тотальной РНК из культур клеток эукариот

10

3.2. Определение чистоты и концентрации РНК на спектрофотометре NanoVue Plus, GE Healthcare

2

4. Постановка реакции ПЦР-анализа в режиме реального времени с помощью автоматического анализатора Lyht Cycler 96, Rosche

24 часа

4.1. Приготовление реакционной смеси для реакции обратной транскрипции

6

4.2. Программирование Light Cycler 96 и постановка ПЦР в режиме реального времени

16

4.3. Обработка результатов c помощь ПО Light Cycler

2

5. Принципы выделения нуклеиновых кислот из цельной крови человека

6 часов

5.1. Приготовление рабочих растворов

0,5

5.2. Выделение тотальной ДНК фенол-хлороформным методом

5

5.3. Определение концентрации ДНК на спектрофотометре NanoVue Plus, GE Healthcare

0,5

6. Основные принципы ПЦР-анализа

6 часов

6.1. Приготовление ПЦР-смеси

3

6.2. Приготовление агарозного геля

0,5

6.3. Загрузка геля в электрофоретическую камеру

0,5

6.4. Горизонтальный электрофорез

1

6.5. Детекция результатов электрофореза с помощью трансилюминатора

0,5

6.6. Предварительный анализ результатов

0,5

ИТОГО:

61 час