Молекулярно-генетические методы исследований. Количественная ПЦР
Практические основы |
Время, час. |
1. Принципы организации ПЦР-лаборатории |
9 часов |
1.1. Техника безопасности и охрана труда. Оборудование. Основные правила обращения. |
1 |
1.2. Подготовка рабочего места. Подготовка посуды, инструментария, пластика, реагентов для работы |
3,5 |
1.3. Уборка помещения, чистка, мытье и подготовка оборудования и инструментария к стерилизации |
3,5 |
1.4. Составление дизайна и программирование эксперимента |
0,5 |
1.5. Правила ведения журнала эксперимента. Заполнение. |
0,5 |
2. Принципы выделения нуклеиновых кислот из цельной крови человека |
11 часов |
2.1. Выделение тотальной РНК из плазмы сорбционным методом |
5 |
2.2. Выделение тотальной ДНК сорбционным методом |
5 |
2.3. Определение чистоты и концентрации нуклеиновых кислот на флюориметре Qubit4 |
1 |
3. Постановка реакции ПЦР-анализа в режиме реального времени с помощью автоматического анализатора «Rotor-Gene 6000», Corbett Life Science (Австралия) |
26 часов |
3.1. Приготовление реакционной смеси для проведения ПЦР |
13 |
3.2. Приготовление реакционной смеси для реакции обратной транскрипции |
3 |
3.3. Программирование «Rotor-Gene 6000» и постановка ПЦР в режиме реального времени |
10 |
3.4. Обработка результатов c помощь ПО «Rotor-Gene 6000» |
2 |
3.5. Относительный экспрессионный анализ циркулирующих микроРНК методом ПЦР в режиме реального времени |
8 |
ИТОГО: |
46 часов |