Практические основы

Время, час.

1. Принципы организации лаборатории микроскопии

2 часа

1.1. Техника безопасности и охрана труда. Оборудование. Основные правила обращения. Настройка параметров.

1

1.2. Составление дизайна и программирование эксперимента

0,5

1.3. Правила ведения журнала эксперимента. Заполнение.

0,5

2. Принципы фиксирования и нарезки тканей мелких лабораторных животных (крыс, мыши) для ИГХ

20 часов

2.1. Подготовка растворов и инструментов для интракардиальной перфузии грызунов и последующего хранения тканей

2

2.2. Интракардиальная перфузия 4% параформальдегидом органов и тканей мыши

6

2.3. Получение срезов фиксированного мозга мыши с помощью вибратома

12

3. Основные принципы световой микроскопии

3 часа

3.1. Конфокальная микроскопия. Инвертированный лазерный сканирующий микроскоп Olympus FV10i

1

3.2. Скрининг-микроскопия с помощью ZOE BioRad

1

3.3. Обработка микроизображений с помощью ПО ImageJ

1

4. Основные подходы при проведении ИГХ

81 час

4.1.1. Пробоподготовка и разведение антител для ИГХ окраски

3

4.1.2. ИГХ окраска флотирующих срезов мозга мыши

36

4.1.3. Фиксирование окрашенных срезов на предметных стеклах

6

4.1.4. Фенотипирование (ИГХ) нейроны

12

4.1.5. Фенотипирование (ИГХ) астроциты

12

4.1.6. Фенотипирование (ИГХ) эндотелиоциты

12

ИТОГО:

106 часов