Современные методы выделения и культивирования церебральных клеток млекопитающих
Практические основы |
Время, час. |
1. Принципы организации лаборатории клеточной биологии и нейробиологии |
2 часа |
1.1. Техника безопасности и охрана труда. Оборудование. Основные правила обращения. Настройка параметров. |
1 |
1.2. Составление дизайна и программирование эксперимента |
0,5 |
1.3. Правила ведения журнала эксперимента. Заполнение. |
0,5 |
2. Принципы получения гиппокампа из мозга мелких лабораторных животных |
47 часов |
2.1. Выделение клеток головного мозга мышей |
7 |
2.2. Методика выделения клеток (нейросферы, нейроны+астроциты, эндотелиоциты ) и первичный посев |
40 |
3. Принципы культивирования клеток головного мозга |
26 часов |
3.1. Приготовление питательных сред |
1,5 |
3.2. Смена сред и пассаж клеток |
23 |
3.3. Методика заморозки и разморозки клеток |
1,5 |
4. Контроль клеточной пролиферации. Фенотипирование |
20 часов |
4.1. Микроскопия и контроль роста клеточного монослоя |
4 |
4.2. Измерение транс-эндотелиального сопротивления |
1 |
4.3. Оценка пролиферативной активности клеток в динамике культивирования |
1 |
4.4. Иммуноферментное окрашивание клеток (ИГЦХ) |
8 |
4.5. Флуоресцентная и лазерная микроскопия |
6 |
5. Биотехнологические решения в моделировании гематоэнцефалического барьера in vitro |
10 часов |
5.1. Формирование ГЭБ/НВЕ in vitro |
6 |
5.2. Выделение гиппокампа из мозга мелких лабораторных животных |
2 |
5.3. Нарезка органотипических срезов гиппокампа с помощью чоппера |
2 |
ИТОГО: |
105 часов |